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生活饮用水中菌落总数验证报告

发表于:2015-12-16来源:www.chempx.com

生活饮用水中菌落总数验证报告

1. 检验标准GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 微生物指标 

2.验证项目:菌落总数

3.合格标准:试验组的菌回收率不得低于70%。(试验组菌数-供试品对照组菌数)÷菌液

组≥ 70%

4.实验材料:

4.1 高压蒸汽灭菌器

4.2 干热灭菌箱

4.3 培养箱36±1

4.4 电炉

4.5 冰箱

4.6 天平

4.7 pH计或精密pH试纸

4.8 灭菌试管、平皿(直径9cm)、刻度吸管、采样瓶等。

5.菌液制备:

5.1 取大肠埃希氏菌(ATCC 25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)菌种第 3代~代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(18h24h),分别用 5.0mL 吸管吸取 3.0 mL5.0mL 稀释液加入斜面试管内,反复吹吸,洗下菌苔,制成混合菌液。随后,用 5.0mL 吸管将洗液移至另一无菌试管中,用电动混合器混合(振荡)20s,或在手掌上振敲 80 次,以使细菌悬浮均匀。

5.2 初步制成的菌悬液,先用血球计数板测显微计数其含菌浓度,然后以稀释液稀释至所需使用的浓度。

6.培养基和试剂的制备:

6.1 营养琼脂培养基:称取营养琼脂干粉培养基33g,溶于1000mL蒸馏水中,加热溶解,分装,121高压灭菌15min

6.2 无菌生理盐水:称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中,分装,121高压灭菌15min

7. 饮用水中细菌总数的测定方法验证

验证试验进行 3次独立的平行试验,并分别计算各试验菌每次的回收率。

7.1  试验组:取水样1mL30300cfu试验菌,分别注入平皿中,立即倾注

1520mL冷却到46左右的营养琼脂培养基,旋转平板,将培养基与样液充分混合,待培养基凝固后,翻转平皿,置36±1的培养箱中培养48h,并做平行样。

7.2. 菌液组:取1ml菌液浓度为30300cfu/mL试验菌测定所加的试验菌数,做平行样。

7.3. 供试品对照组:取水样1mL,按菌落总数平板计数方法测定供试品本底菌数。

7.4. 结果见表

试验组细菌平板计数(回收率%

 

验证菌株

平皿号

供试品对照组cfu/mL

菌液组cfu/mL

试验组cfu/mL

回收率%

独立试验一

大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌(36℃±1培养48h计数)

1

30

260

270

91.9

2

35

260

280

独立试验二

大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌(36℃±1培养48h计数)

1

20

280

270

88.9

2

25

286

278

独立试验三

大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌(36℃±1培养48h计数)

1

28

250

260

94.0

2

30

265

282

 

7.5.结论:3次独立的平行试验中,采用培养基稀释法,回收率均大于 70% 本次验证共进行三次,在相同的检验条件下,检验结果均符合规定。

 

8.是否对方法偏离

9.结论:

生活饮用水中菌落总数的检测符合标准GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 微生物指标》的要求

 

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